Як зробити послідовне розведення: 9 кроків

У хімії розведенням називають процес, в результаті якого зменшується концентрація речовини в розчині. Послідовне розведення складається з повторних розведень, що дозволяє дуже швидко зменшити початкову концентрацію. Цей метод використовується в експериментах, в яких потрібні сильно розбавлені розчини з точною концентрацією, часто визначається за логарифмічною шкалою, або коли необхідно знайти щільність бактерій. Послідовне розведення широко застосовується в експериментальних науках, таких як біохімія, мікробіологія, фармакологія, фізика.

кроки

Метод 1 з 2:

послідовне розведення

1. Виберіть відповідний розчинник. При розведенні дуже важливо вибрати правильний розчинник, або буфер. Багато розчини можна розводити дистильованою водою, однак це не завжди так. Якщо ви розбавляєте бактерії або інші клітини, вам знадобиться відповідна культурне середовище. Обраний буфер слід використовувати при всіх послідовних розведеннях.

Якщо ви не впевнені в тому, що краще використовувати в якості буфера, запитайте у вчителя або пошукайте потрібну інформацію в інтернеті: можливо, хтось вже готував подібний розчин.

2. Приготуйте кілька пробірок з 9 мілілітрах буфера. Ці пробірки зіграють роль заготовок для розведення. Ви помістіть розбавляється зразок в першу пробірку, а потім послідовно переллєте розчин в наступні пробірки.

Перед початком роботи корисно помітити всі використовувані пробірки, щоб не сплутати розчини в процесі розведення.

Кожна наступна пробірка буде містити в 10 разів менше концентрований розчин, ніж попередня. У першій пробірці концентрація розчину складе 1:10, у другій - 1: 100, у третій - 1: 1000, і так далі. Заздалегідь визначте, скільки розведень вам знадобиться, і приготуйте відповідне число пробірок.

3. Приготуйте пробірку з хоча б 2 мілілітрами нерозбавленого розчину. Для послідовного розведення даним методом потрібно не менше 1 мілілітра нерозбавленого розчину. Якщо є всього лише 1 мілілітр, то у вас не залишиться нерозбавленого розчину. Напишіть на цій пробірці НР (Нерозбавлений розчин).

Перед кожним розведенням ретельно перемішайте розчин.

4. Проведено перший розведення. Наберіть в піпетку 1 мілілітр нерозбавленого розчину з пробірки НР і перелийте його в пробірку з позначкою 1:10, в якій міститься 9 мілілітрів буфера, після чого ретельно перемішайте. В результаті у вас вийде розчин, розведений 9 мілілітрах буфера. Таким чином, концентрація розчину зменшиться в 10 разів.

5. Приготуйте наступний розчин. Для другого послідовного розведення візьміть 1 мілілітр розчину з пробірки 1:10 і додайте до 9 мілілітрів буфера в пробірці 1: 100. Попередньо як слід перемішайте розчин в пробірці 1:10. Після того як ви додасте розчин в пробірку 1: 100, ретельно перемішайте її вміст. В результаті ви насадили розчин з пробірки 1:10, і у вас вийде новий розчин з концентрацією 1: 100.

6. При необхідності продовжуйте розводити розчин. Даний процес можна повторювати скільки завгодно доти, поки ви не досягнете потрібної концентрації. Якщо в експерименті слід визначити залежність від концентрації, можна послідовно приготувати розчини 1, 1:10, 1: 100, 1: 1000.

Метод 2 з 2:

Розрахунок коефіцієнта розведення і кінцевої концентрації

1. Визначте коефіцієнт розведення кінцевого розчину. Для цього слід перемножити всі послідовні коефіцієнти розведення. Відповідна формула має такий вигляд: D_t = D₁ x D₂ x D₃ x ... x D_n, де D_t - загальний коефіцієнт розведення, D_n - коефіцієнт n-го розведення.

Припустимо, ви 4 рази провели розведення з співвідношенні 1:10. Підставами цей коефіцієнт в формулу і отримаємо D_t = 10 x 10 x 10 x 10 = 10.000.
Таким чином, після останнього розведення в четвертій пробірці вийде розчин 1:10.000, тобто кінцевий розчин буде в 10.000 менше концентрованим, ніж вихідний (нерозбавлений).

2. Визначте концентрацію розчину після розведення. Щоб визначити концентрацію розчину після послідовного розведення, необхідно знати вихідну концентрацію. використовуйте формулу C_{кінцева} = C_{вихідна}/ D, де C_{кінцева} - концентрація розведеного розчину, C_{вихідна} - вихідна концентрація, D - визначений вище коефіцієнт розведення.

Приклад: якщо концентрація вихідного розчину становила 1.000.000 клітин на мілілітр, а коефіцієнт розведення дорівнює 1.000, чому дорівнює концентрація кінцевого розчину?

Використовуємо формулу:

C_{кінцева} = C_{вихідна}/ D

C_{кінцева} = 1.000.000/1.000

C_{кінцева} = 1.000 клітин на мілілітр.

3. перевірте розмірність. При проведенні будь-яких розрахунків слід упевнитися, що ви отримали правильні одиниці вимірювання. Якщо ви почали з кількості клітин на мілілітр, прослідкуйте, щоб результат також був отриманий в цих одиницях. Якщо ви проводите розрахунки в проміле (ppm), отримана концентрація також повинна бути виражена в проміле.